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六胺銀染色又稱 PASM 染色,是臨床常用的一種組織化學染色技術,以下是關于它的詳細介紹:
染色原理:標本經高碘酸等氧化劑氧化后,使真菌和其他機會性生物的細胞壁內的粘多糖以及組織基底膜內的多糖暴露出醛基,醛基將六胺銀還原為黑色的金屬銀,從而使真菌、基底膜等被染成黑色。硫代硫酸鈉對已顯色的銀鹽起固定作用,并除去未反應的銀離子。
染色步驟
切片預處理:石蠟切片進行常規的脫蠟至水洗步驟,以去除切片上的雜質和油脂,為后續染色做好準備。
化學處理:將切片依次放入 5% 鉻酸水溶液處理 1 小時,隨后用自來水沖洗 5 分鐘;再放入 1% 亞硫酸氫鈉水溶液中處理 30 分鐘,之后用自來水沖洗 3 分鐘,并用蒸餾水充分洗滌,以去除多余的化學物質。
六胺銀染色:將預熱至 60°C 的六胺銀應用液倒入染色缸中,將切片放入并染色 1 小時。期間需密切觀察切片顏色變化,當切片呈現淡黃色且顯微鏡下觀察到淡棕色菌體時,應每隔 5-10 分鐘觀察一次,以精確控制菌體著色深淺,直至達到理想的顯色效果。隨后,用蒸餾水洗滌切片 5-6 次。
后續處理:將切片放入 0.1% 氯化金水溶液中調色 4 分鐘,再用蒸餾水洗滌 1-2 分鐘;接著放入 3% 硫代硫酸鈉水溶液中處理 5 分鐘,以進一步穩定染色效果。然后自來水洗 1 分鐘,蒸餾水洗 1 分鐘。
復染與封片:將切片放入淡綠染液中復染 20 秒,隨后用流水沖洗 20-60 秒以去除多余染液。最后,經過 95% 酒精和無水酒精脫水、二甲苯透明處理,用樹膠封片,以備觀察。
2025-11-07
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